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Proteomics 3D solution 蛋白質組學3D解決方案
發表日期:2012-06-29
 

發現2D看不到的低豐度蛋白! 

開創蛋白質組學研究的新時代

隨著蛋白質組學研究開展的越來越廣泛及深入,傳統的研究手段遇到了很大的挑戰。一些比較容易發現和研究的高豐度蛋白質被大量報道,而低豐度蛋白質則很難被分離和富集,造成研究的困難。

現在,一種全新的研究技術可以通過在液相狀態下按等電點分離粗樣品,富集低豐度蛋白質,再結合微pH膠條實現3D研究。

研究低豐度蛋白的最有力工具

1D

低豐度蛋白富集儀

MicroRotofor 微型電泳槽是一種制備型等電聚焦(IEF)儀,它可以將溶液中的復雜蛋白樣品按等電點不同分開。無論是單獨使用還是做為完整蛋白純化流程的一部分,MicroRotofor微型電泳槽都可以簡單、快速、有效地將蛋白從復雜的蛋白混和物中分離和富集出來。使用MicroRotofor 微型電泳槽,等電聚焦(IEF)是在可自由流動的溶液中進行的。因此,每一個組分都可以非常容易地收集得到,甚至可將某些組分再進行分離。液相IEF對于分離那些在凝膠IEF介質中易于沉淀或分離不好的蛋白更有效。而且,在溶液中進行IEF能夠讓蛋白保持其天然等電點(pI)。最后,因為IEF的pH梯度是通過載體兩性電解質產生的,所以用戶可以隨心所欲地造成任意連續的pH梯度,從而真正通過pI值篩選蛋白樣品。

特點

優勢

設計

小量蛋白溶液體積

  • 容許研究者分析非常有限的蛋白樣品
  • 可以自主優化分離流程
  • 與其他蛋白分離溶液兼容 (例如 Aurum 血清蛋白小型試劑盒, ReadyPrep 雙向電泳凈化試劑盒)
  • 使用Rotofor 和小型 Rotofor電泳槽分離的組分可以用來再次分離

易于安裝

  • 用戶友好
  • 節省時間

10個組分(200–250 μl/組分)

  • 完全、徹底地從樣品中篩選蛋白
  • 富集特定蛋白濃度可達10倍
  • 如果只需較少組分,可將組分合并

內置Peltier半導體冷卻: (2 檔:-20°C或-10°C)

  • 聚焦時保持恒溫將提高重復性
  • 防止蛋白質水解和胺甲?;?
  • 可實現蛋白質天然狀態下分離 (保持蛋白的天然構向和功能)

緊湊的外形

  • 可放置于任何實驗桌上

技術

液體分離介質

  • 可分離在其它介質中難溶的蛋白 (例如疏水蛋白、膜蛋白、大分子量蛋白等)
  • 易于配合其它的分離方案
  • 可實現蛋白質天然狀態下分離

膜核心

  • 在收集蛋白時可防止組分間液體相互流動,從而使組分更穩定

連續pH梯度/建立特定pH值

  • 可通過等電點篩選蛋白
  • 可分辨異構體
  • 靈活性 — 可根據不同pH梯度
  • 可與窄范圍和微小范圍的IPG膠條的結果相匹配

真空收集

  • 快速簡便
  • 防止了組分間的交叉污染

一次性使用的分離腔

  • 使用方便
  • 防止了組分間的交叉污染

可旋轉腔體

  • 可使溶液充分混勻
  • 減輕蛋白沉淀和對流對電泳的影響

 

 ?         在蛋白組學研究中,經典的雙向凝膠電泳法(2-DE)對堿性蛋白及低豐度蛋白的分離存在技術障礙,但預分離技術的應用可彌補其缺陷。液相等電聚焦可有效地分離富集復雜蛋白樣品。堿性膠條用于2-DE可極大地提高蛋白上樣量和凝膠分辨率。將上述兩種技術相結合用于堿性蛋白質和低豐度蛋白質的分離鑒定,可使堿端區域雙向凝膠圖譜質量顯著提高,蛋白點更清晰且點數增多,質譜鑒定確信度提高,堿性蛋白和低豐度蛋白質譜鑒定成功率提高,對于蛋白組學研究具有一定的意義。

—— 楊芃原,中國人類蛋白質組組織(CHINA-HUPO)副理事長

 

相關鏈接:

 

液相等電聚焦大顯神威:

//www.biosou.com/index_newshow.php?newsid=13257

 

用液相等電聚焦電泳純化藻藍蛋白亞基:

//www.cnki.com.cn/Article/CJFD2006-GDXH200606015.htm

 

液相等電聚焦結合雙向凝膠電泳分離堿性蛋白:

//www.ilib.cn/A-gdxxhxxb200610009.html

 

人胃癌組織中分子伴侶蛋白的表達及檢測:

//www.wjgnet.com/1009-3079/13/1809.asp


2D

固相干膠條等電聚焦系統

 

PROTEAN® IEF等電聚焦儀

PROTEAN等電聚焦電泳儀可同時滿足高通量實驗室或普通用戶的需要。它是IEF實驗用的專用設備,具有以下特點:

? 高通量電泳平臺,可容納多達24根7cm膠條或12根11cm、17cm、18cm 和 24 cm 膠條

? 半導體冷卻平臺 ( Peltier-effect ) 精確溫控,保證可重復的聚焦結果和更大范圍的工作溫度 ( 10-25℃ )

? 內置10,000V高壓, 2.4mA電流的電源,當達到最高電壓時,可更快地達到等電 聚焦所要求的理想伏特小時

? 一次性水化/平衡盤簡化了水化膠條轉移到聚焦盤的過程,保證殘余的樣品緩沖液不會通過膠條干擾電流而影響結果

? 有多種聚焦盤和水化/平衡盤可供方便選擇;每個盤均能裝載1-12根膠條。作為自動化的操作方法可直接在聚焦盤進行水化和等電聚焦過程。為提高實驗效率,也可在水化/平衡盤水化膠條的同時,在聚焦盤里聚焦另一組膠條

? 提供預設程序和實時編輯多種方式,最大程度地滿足用戶的不同需要?;諼謀鏡撓沒Ы緱?,可極簡便的編輯程序并允許用戶對運行程序進行不斷更新

? 可選配熱敏打印機,永久記錄程序和所運行的數據,運行的數據可通過RS-232 串口傳送至電腦中


3D

垂直電泳分離系統

 

微型PROTEAN  Cell系統——世界上最受普遍歡迎的、最方便使用的電泳槽

1.  嵌條天然固定在玻璃板上,省卻了分離式嵌條時代的麻煩,且避免了不同厚度的擔憂;

2.  平行式和推抐式的組裝易如反掌。

3.  兼容預制膠和手灌膠。

4.  玻板、樣品梳上均有厚度、孔數的標記,易于識別。

5.  專利的加樣導向幫助,不必猜測加樣孔的位置。

6.  塑料樣品梳不會影響聚合過程,并有防氣泡設計。

7.  用轉移組件做Western Blotting時,只需1個小時,且所耗緩沖液極少,有內置的冷卻器。

PROTEAN II Xi和新型XL垂直板電泳槽

1.  適用于一系列電泳,如SDS-PAGE,雙向電泳的一向和二向,Native電泳,制備電泳,梯度電泳及高分辨率核酸瓊脂糖電泳。

2.  可同時運行四塊膠,多種膠長度選擇。

3.  內置冷卻芯,可接冷卻水,冷卻循環池或裝入冷卻劑,即可消除微笑現象。

 

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